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                K1622逆轉錄酶活性測定方法

                發布時間:2020-01-15 點擊次數:628次
                  K1622逆轉錄酶--種依賴于RNA的DNA聚合酶,是逆轉錄病毒(如艾滋病病毒、乙肝病毒等)特有的酶,因此通常成為艾滋病和病毒性肝炎等逆轉錄病毒所引發疾病的藥物作用靶點,其抑制劑有核苷類似物和非核苷類物質,前者具有較強毒性且已產生耐藥性,進一步尋找非核苷類RT抑制劑對艾滋病和病毒性肝炎等逆轉錄病毒所致疾病的治療具有重要意義。
                  K1622逆轉錄酶試劑盒使用的RevertAidReverse Transcriptase具有的RNase H活性比AMV reverse transcriptase低。試劑盒配套提供的重組RiboLock™RNase Inhibitor有效保護RNA模板免于降解。該產品與逆轉錄反應完全兼容,因為其在50°C時仍然保持活性。試劑盒配套提供oligo(dT)18和隨機六聚體引物。oligo(dT)18與mRNA的poly(A)尾選擇性結合。隨機六聚體引物轉錄無需poly(A)尾,因此可轉錄mRNA的5’-端區域,也可以無poly(A)尾的RNA(micro RNAs)為模板合成cDNA。試劑盒也可使用基因特異性引物。
                  K1622逆轉錄酶活性測定方法:根據Pyral14等所報道的方法以MSRNA為模板,在有外源RT作用時產生cDNA,再用PCR方法進行擴增從而檢測RT活性,該方法稱為(PERT是目前公認的檢測RT的敏感方法,也是WHO推薦的用以檢測生物制品的逆轉錄病毒的方法。由于逆轉錄病毒能夠傳染人及多種物種,引起免疫缺陷、白血病和淋巴細胞癌等多種疾病所
                  以生物制品的逆轉錄病毒的安全檢定非常重要。活性測定是檢定逆轉錄病毒的方法之一,與其他測定方法相比具有費用低方法簡單,且可隨時測定單個樣本不需等待成批樣本同時測定等優點。因此,反映病毒毒力的活性測定在HIV致病性及治療等研究中具有重要意義。

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                021-65672052
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